　　制備需以高純度志賀氏菌標準菌株為基礎。首先選取具有典型抗原性的菌株（如痢疾志賀氏菌1型、福氏志賀氏菌2a型），經固體培養基傳代培養后，通過甲醛滅活處理確保安全性，同時保留完整O抗原結構。隨后采用家兔作為免疫動物，按照“基礎免疫-加強免疫”程序注射菌液，首劑加佐劑增強免疫應答，后續每隔7天追加免疫，直至血清凝集效價達標。?

　　免疫結束后，采集兔血并分離血清，需通過3步純化提升特異性：一是56℃30分鐘滅活補體，避免干擾后續反應；二是采用硫酸銨鹽析法沉淀免疫球蛋白，去除雜蛋白；三是通過透析脫鹽與凝膠過濾層析，最終獲得純度≥90%的免疫球蛋白G（IgG）組分，確保血清不含非特異性抗體。?

　　二、標化：建立精準的效價與特異性標準?

　　標化是保障血清實用性的核心環節，需圍繞效價標定與特異性驗證雙維度開展。效價測定采用微量凝集法，將血清進行倍比稀釋后與標準菌液反應，以出現“++”凝集的最高稀釋度為終點效價，要求診斷用血清效價不低于1:1280，參考血清不低于1:2560。?

　　特異性驗證需通過交叉凝集試驗排除干擾：一方面與其他志賀氏菌血清型菌株反應，確認無交叉凝集；另一方面與大腸埃希菌、沙門氏菌等近緣菌反應，確保無假陽性。同時采用Westernblot檢測，驗證血清僅與志賀氏菌O抗原蛋白特異性結合，分子量偏差需控制在±5%以內。?

　　三、質控：構建全流程質量保障體系?

　　質控需覆蓋生產全周期，設立三大關鍵節點。原料質控要求菌株純度≥99.9%，無噬菌體污染；過程質控通過實時監測免疫兔抗體水平，確保效價波動≤10%；成品質控實施雙重檢測，既通過無菌試驗確認無微生物污染，又通過穩定性試驗驗證2-8℃儲存6個月內效價下降不超過15%。?

　　此外，需建立追溯體系，每批次血清附帶批號，記錄生產、標化、質控數據，同時定期與國家參考品比對，確保量值溯源準確性，最終實現志賀氏血清從制備到應用的全程質量可控。

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